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GÉLOSE HEKTOEN
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Milieu sélectif pour l’isolement des bactéries à Gram négatif
(Salmonella et Shigella)

COMPOSITION: en grammes par litre d'eau distillée

Peptone.........................................12
Extrait de levure............................3
NaCl...................................... .......5
Sels biliaires.................................9
Thiosulfate de sodium.................5
Citrate de fer ammoniacal..........1,5
Lactose.........................................12
Salicine.........................................2
Saccharose...................................12
BBT..............................................0,002
Fuchsine acide.............................0,1
Agar…….....................................14
                 pH final = 7,5

 

PRINCIPE, INTERET


La gélose Hektoen est un milieu sélectif de choix pour l'isolement des salmonelles et des shigelles. En effet:

  • Extrait de levure, glucides et qualité des peptones favorisent la croissance de ces bactéries
  • Les sels biliaires, agents sélectifs, inhibent la culture des bactéries à Gram positif et limitent le développement des coliformes (entérobactéries lactose + avec production de gaz) et de Proteus.

L'orientation de l'identification est basée sur l'utilisation de 3 glucides: lactose, saccharose, salicine, repérable grâce à 1 indicateur de pH (BBT) auquel a été combiné un colorant (fuchsine).
La présence de thiosulfate et de citrate de fer permet la mise en évidence de la production d'H2S.

LECTURE: après 24 heures à 37°C en aérobiose, en général 
1°) Utilisation des glucides:

  • Colonies saumon: acidification du milieu, utilisation d'un ou plusieurs glucides parmi le lactose, le saccharose, la salicine.
  • Colonies bleu-vert: absence d'acidification du milieu, souche lactose -, saccharose -, salicine -.

2°) Production d'H2S:

  • Colonies noires ou à centre noir: production de sulfure de fer noir due à la réduction du thiosulfate en H2S: souche H2S +.
  • Colonies sans centre noir: absence de production de sulfure de fer par réduction du thiosulfate en H2S: souche H2S -.

Orientation :


Colonies saumon sans centre noir

Colonies saumon à centre noir

Colonies bleu-vert sans centre noir

Colonies bleu-vert à centre noir

E. coli
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Yersinia
Vibrio cholerae

Citrobacter
Proteus vulgaris

Salmonella H2S –
Shigella
Morganella
Providencia
Hafnia
Pseudomonas

Salmonella H2S +
Proteus mirabilis

 

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Par Brigitte VERON - Collectif Photo-Reims